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至细菌污染核酸检测方面取得进展

发布时间:2021-09-19

细菌污染核酸检测方面取得进展

目前,核酸筛检系统已广泛用于血制品常规病原体的核酸检测,极大下降了相干疾病的输血传播。但是,在输血感染性风险中, 血小板轨道交通、高端电子装备中广泛使用的细菌污染及相干败血症性输血反应还是辣手的问题。将核酸筛检技术用于细菌污染检测还有很多困难,包括:1、细另外菌污染不像特定病原体,没有统1的标 准品;2、缺少适合的内参质控排除假阳性或假阴性结果;3、核酸扩增聚合酶大多是细菌来在产生火灾时源,带有痕量的细菌核酸成份。

中国科学院苏州生物医学工程技术研究所血液免疫学研究中心则提出1种两重荧光定量PCR方法可提高细菌污染检测的可靠性:设计1条人工核酸序列 作为内参,其特点是IRC与靶基因共用同1对引物进行扩增,分别用不同荧光探针进行检测。通过控制IRC份子数到达阳性检出限,以其 Ct值作为阈值,只有样本检测的Ct值小于或等于Ct时,检测结果才可认定为阳性。1种双样本混合的t测验统计学方法可用于帮助判断两个Ct值的大小。IRC还可以包装成噬菌体,用于监控核酸样本提取进程。

至细菌污染核酸检测方面取得进展

另外,该两重荧光定量PCR方法可通过分别检测细菌的DNA与RNA,计算不同Ct的比值,能判断细菌是处于生长繁殖期 或已是死菌,从而帮助判断血制品灭活的效果。该方法不但能用于血制品细菌污染检测,理论上也能开发成其他外源基因核酸定量检测的有效方法。